生化試劑空白吸光度是反映試劑質量的指標之一，但不能反映試劑質量的全部。試劑成份、純度、用量及穩定性，才是保證試劑質量的關鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用，主要是通過加入抗干擾物質或使用新的色素原以避免內源性物質的干擾。但值得注意的是：一些試驗項目在消除內源性物質干擾的同時，會帶來樣品含量真實性的變化。

　　一、試劑空白

　　生化試劑空白吸光度是反映試劑質量的指標之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質;如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變為紅色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉肽酶、淀粉酶等檢測試劑會因基質分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶等負反應，在放置過程中其試劑空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降。

　　原則上，吸光度上升的反應，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限;相反，吸光度下降的反應，其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此，生化試劑空白吸光度限值，常作為程序參數輸入儀器，如經核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。需要指出的是，還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質的原料，往往需要加大用量，才使“表觀”吸光度上升，湊合過試劑空白核對的“關”，其后果為如下情況：

　　a.線性范圍變窄。現象：高值測不高。原因：生產試劑時有效成分投料量不足;試劑成份穩定性較差。

　　b.靈敏度變低現象：酶促反應速度曲線斜率下降，測定結果有嚴重系統誤差。原因：試劑底物濃度不足。

　　c.低值偏高現象：生化試劑空白的變化曲線(吸光度VS時間)明顯波動。原因：試劑自身不穩定，自行分解;工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導致干擾作用。

　　二、樣品信息

　　樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結果產生非化學反應的干擾。因此，應根據溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，并在結果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。

　　三、測定范圍

　　每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經變質，應更換合格生化試劑。

　　四、酶的預活化

　　測定血清中的某些酶，如CK，離體(采血)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當的還原作用才能重新激活。

　　五、底物耗盡

　　使用連續監測法、兩點法測定酶活性時，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍，監測期的吸光度將偏離線性，使測定結果不可靠。

　　六、校準與結果溯源性

　　酶的校正：要滿足在同一方法學、同一測定條件、與理論計算的FACTOR值差異不大，沒有發現有明顯影響因素，方可進行校正。

　　檢驗結果溯源性，得建立一個可靠的參考系統作為準確性基礎，然后將準確性轉移到常規方法測定中去，使常規方法測定結果可溯源到參考系統所提供的準確性基礎上來。在實現溯源性目標過程中，永遠以患者新鮮標本為實驗對象，以方法學對比試驗方法為驗證手段。方法學對比試驗常采用回歸方程進行統計分析，假如斜率接近1，截距較小，這意味著實驗室常規方法對標本測定結果和溯源目標參考系統對標本檢測結果非常接近。

　　校準液標示值往往是按其基質偏差修正的，所以標示值并非實際值。校準液、質控血清通常是經過處理的混合人或動物血清，這種制備物在特定分析系統中往往與人新鮮血清反應性不同而產生基質偏差。如總膽固醇測定基質效應研究指出：校準液酶法測定回收結果偏低可達5%~7%。

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